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技术成果

编号
370
类别 专利
项目名称
一种DNA构建物以及DNA体外拼接方法
项目简介
本发明提供了一种基于合成生物学方法的模块化体外拼接 DNA 的方法(iBrick)。采用在基因组中极为稀少的归位内切酶 I-SceI 和PI-PspI 作为末端拼接的接口,对 DNA 进行工程化、标准化、模块化的改造或组装。
本发明的主要优点在于:
1)由于归位内切酶识别的序列远长于常规的内切酶,多达 12-40 个碱基对,其识别位点在天然 DNA 序列中非常稀少。因此,在构建 iBrick 标准化元件时,基本上不需要进行 DNA 内部酶切位点的去除,这使得这个技术能够不需要改造原始的序列就能够容纳更大的生物元件,能够直接利用有更好表征的天然序列,极大地减少了标准化生物元件的工作量,增加了这个组装技术中循环组装策略使用的普适性;
2)长的识别序列也为长片段的克隆和拼接提供了单一酶切位点,使得单个生物元件的容量可以大大增加。因此,该技术在长片段 DNA 序列的标准化、组装和表征等方面具有显著的优点;
3)使用两个酶代替之前标准的四个酶,使组装过程更简化。
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项目和技术情况
基本信息
本发明提供了一种 DNA 构建物含有结构如式“Ha- C-Hb”所示的核酸序列,式中,Ha 为第一归位内切酶酶切位点;C 为待拼接的核酸序列;Hb 为第二归位内切酶酶切位点;其中,第一归位内切酶和第二归位内切酶为不同种类的同尾归位内切酶。本发明还提供了上述 DNA 构建物的应用和使用该 DNA 构建物的一种 DNA体外拼接方法。使用本发明的构建物和方法能够对 DNA 进行工程化、标准化、模块化的改造或组装。
成熟产品或解决方案
小试阶段
是否申请专利,有哪些
专利申请目前实质审查中,尚未授权。
拟转让对象
微生物发酵、医药、食品、保健品、工业酶、化工领域的企业
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